脫氧核糖核酸的房屋設施的“實時”或聚合酶鏈反應動力學儀，美國應用生物系統(tǒng)模型7700序列檢測系統(tǒng)（熒光定量儀）。聚合酶鏈反應（聚合酶鏈反應）發(fā)生了革命性變化的檢測脫氧核糖核酸和核糖核酸。少為單拷貝一個特定序列可以具體擴增和檢測。理論上，有一個定量關系的起始靶序列和數(shù)量的產(chǎn)品在任何給定周期。在實踐中，雖然，這是一個共同的經(jīng)驗復制反應產(chǎn)生不同數(shù)量的產(chǎn)品。發(fā)展實時定量聚合酶鏈反應消除了變異與傳統(tǒng)的定量聚合酶鏈反應，從而使常規(guī)和可靠的定量聚合酶鏈反應產(chǎn)品。該儀器，因此，現(xiàn)在提供了調(diào)查的能力以執(zhí)行非常靈敏，準確，重現(xiàn)性測量基因表達水平。此外，該儀器可用于其他應用如病毒載量檢測，進行等位基因歧視研究，優(yōu)化反應條件。

答：實時聚合酶鏈反應化學

實時系統(tǒng)的反應是提高探針為基礎的，而不是嵌入，產(chǎn)物的檢測。主要缺點嵌入的檢測擴增產(chǎn)物積累是具體的和非特異性產(chǎn)物產(chǎn)生信號。另一種方法，5 ＇核酸檢測，提供了一個實時檢測方法特異擴增產(chǎn)物。在放大過程中，退火的探針的靶序列，生成一個基板切割的5’核酸酶活性脫氧核糖核酸酶酶時，從上游引物延伸到該地區(qū)的探針。這依賴于聚合確保裂解探頭只發(fā)生如果目標序列的擴增。

發(fā)展的熒光探針，使得有可能消除后的聚合酶鏈反應分析處理探針降解。該探測器是一個寡核苷酸與記者熒光染料和染料附著劑。雖然探頭是完整的，靠近止渴大大減少所發(fā)出的熒光染料記者的örster共振能量轉移（共振）通過空間。探針的設計與合成已簡化的發(fā)現(xiàn)，適當?shù)?/span>淬火觀察為探針，記者在5 ＇端和淬火在3 ＇端。

圖1圖所發(fā)生的熒光探針在延長階段的反應。如果靶序列，探針退火下游從一個入門網(wǎng)站，切割的5’核酸酶活性的脫氧核糖核酸酶作為引物延伸。該裂解探頭分開的記者染料止渴染料，增加染料記者信號。卵裂消除探針從目標鏈，使引物延伸繼續(xù)結束的模板鏈。因此，列入探頭不抑制整個反應過程。額外的記者染料分子被裂解從各自的探針每個周期的影響，增加了熒光強度成正比的擴增生產(chǎn)。

利用熒光探針在核酸結合染料，具體雜交探針和目標的要求產(chǎn)生的熒光信號。因此，熒光探針，特異性擴增由于mis-priming或引物二聚體工件不會產(chǎn)生信號。另一個優(yōu)點是它們可以是熒光探針標記不同，區(qū)別記者染料。通過使用探針標記不同的記者，擴增不同的序列，可以發(fā)現(xiàn)在一個單一的反應。缺點是不同的熒光探針，探針必須綜合檢測不同序列。

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B .儀器儀表

踝臂指數(shù)棱鏡7700序列檢測系統(tǒng)是一個靈活的系統(tǒng)設計，充分利用的好處，熒光探針檢測。7700個系統(tǒng)有一個內(nèi)置的thermalcycler和直接激光通過光纖電纜的96個樣本的威爾斯。熒光發(fā)射流經(jīng)電纜攝像儀。因為每個照射順序，尺寸的陣列可用于光譜分辨率的熒光燈。因為這7700種儀器檢測整個熒光光譜，該系統(tǒng)能夠識別和量化每個樣品以及多熒光。該軟件分析數(shù)據(jù)，首先計算貢獻的每個組成部分染料的實驗譜。每一個記者的信號，然后除以熒光內(nèi)部參考染料（火箭）為規(guī)范non-pcr相關熒光波動發(fā)生交叉或時間。使用這種內(nèi)部參考染料，啟用的能力來區(qū)分流感